CHOK1-mouse-CD70基因過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株產(chǎn)品背景介紹
1. 研究方向
CHOK1-mouse-CD70基因過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株主要用于研究CD70分子在免疫調(diào)節(jié)、腫瘤免疫治療及細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)中的作用。CD70是腫瘤壞死因子(TNF)超家族成員,與其受體CD27結(jié)合后,可激活T細(xì)胞和B細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。該穩(wěn)轉(zhuǎn)株廣泛應(yīng)用于:
腫瘤免疫治療:研究CD70在腫瘤微環(huán)境中的作用及其作為免疫治療靶點(diǎn)的潛力。
免疫調(diào)節(jié):探討CD70-CD27信號(hào)通路在免疫細(xì)胞激活、增殖和分化中的機(jī)制。
藥物篩選:用于篩選靶向CD70的藥物或抗體。
2. 操作步驟
細(xì)胞復(fù)蘇:
從液氮中取出凍存的CHOK1-mouse-CD70穩(wěn)轉(zhuǎn)株,迅速解凍。
將細(xì)胞懸液加入預(yù)熱的培養(yǎng)基中,離心后重懸并接種于培養(yǎng)瓶。
細(xì)胞培養(yǎng):
使用DMEM/F12培養(yǎng)基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素-鏈霉素。
在37°C、5% CO?的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),定期傳代。
基因表達(dá)驗(yàn)證:
通過qPCR或Western Blot檢測CD70基因的表達(dá)水平。
功能實(shí)驗(yàn):
進(jìn)行共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),分析CD70對(duì)免疫細(xì)胞的影響,或用于藥物篩選。
3. 注意事項(xiàng)
無菌操作:避免細(xì)胞污染。
培養(yǎng)基更換:每2-3天更換一次,保持細(xì)胞良好狀態(tài)。
凍存細(xì)胞:使用凍存液(如90% FBS + 10% DMSO),并逐步降溫凍存。
基因表達(dá)穩(wěn)定性:定期檢測CD70表達(dá),防止基因沉默或表達(dá)下降。
4. 文獻(xiàn)參考
CD70在腫瘤免疫中的作用:
Jensen, S. M., et al. (2018). "CD70 as a target for cancer immunotherapy." Cancer Immunology Research, 6(6), 669-677.
CD70-CD27信號(hào)通路:
Nolte, M. A., et al. (2009). "Timing and tuning of CD27-CD70 interactions: the impact of signal strength in setting the balance between adaptive responses and immunopathology." Immunological Reviews, 229(1), 216-231.
5. 細(xì)胞背景資料
CHOK1細(xì)胞:中國倉鼠卵巢細(xì)胞系,常用于重組蛋白生產(chǎn)和基因表達(dá)研究。
CD70基因:編碼CD70蛋白,屬于TNF超家族,主要表達(dá)于活化的T細(xì)胞、B細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞,參與免疫調(diào)節(jié)。
總結(jié)
CHOK1-mouse-CD70基因過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株是研究CD70功能的重要工具,廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)和腫瘤學(xué)領(lǐng)域。通過該穩(wěn)轉(zhuǎn)株,研究人員可以深入探討CD70在免疫調(diào)節(jié)和腫瘤治療中的作用,并開發(fā)相關(guān)治療策略。
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